ШКАЛА ОЦЕНКИ АППЛИКАЦИОННЫХ КОЖНЫХ ТЕСТОВ
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
Результат реакции Условное Описание реакции
обозначение
Отрицательный - Изменения кожи отсутствуют
Сомнительный +- Небольшая эритема без отека
Слабоположительный + Наличие эритемы без отека
Положительный ++ Эритема и отек в месте аппликации
Резко положительный +++ В месте аппликации эритема, отек,
папулы, изолированные везикулы
Очень резко положительный ++++ В месте аппликации гиперемия,
отек, папулы, сливающиеся везикулы
6.6.1.5. Анализ и интерпретация полученных данных
Наноматериал признается безопасным по результатам тестирования, если реакция отсутствует.
6.6.2. Методика конъюнктивальной пробы
6.6.2.1. Принцип метода
Метод позволяет оценить местное раздражающее и аллергизирующее действие наноматериала.
6.6.2.2. Животные, оборудование и материалы
6.6.2.2.1. Животные
Исследования проводят на следующих видах лабораторных животных: морские свинки (масса
тела 250 - 300 г), кролики. В случае использования линейных животных необходимо указать линию
животных.
Наиболее чувствительным, в видовом отношении, животным является морская свинка. Разброс
в экспериментальных группах по исходной массе не должен превышать +/- 10%. Чувствительность
самцов и самок к одному и тому же препарату может быть неодинакова, поэтому желательно
проведение эксперимента на животных обоих полов. Опыты проводят на молодых, здоровых и
половозрелых животных.
Количество животных в группе зависит от целей исследования, но не должно быть менее 10
особей в группе. Разброс по исходной массе тела животных в группе не должен превышать +/- 10%.
В течение всего эксперимента животные должны иметь свободный доступ к корму и питьевой воде
(за исключением времени измерения физиологических параметров). Для унификации исследований
животные на протяжении всего эксперимента получают полусинтетический рацион согласно МУ
1.2.2520-09 "Токсиколого-гигиеническая оценка безопасности наноматериалов".
6.6.2.2.2. Материалы и реактивы
Дозаторы пипеточные по ТУ 64-16-55-90 с диапазоном объема доз 20 - 200 куб. мм, 200 - 1000
куб. мм и дискретностью установки доз 1 и 5 куб. мм, соответственно, с наконечниками.
6.6.2.3. Метод введения наноматериалов животным
Рекомендуется в качестве растворителя наноматериала использовать дистиллированную воду и
изотонический раствор натрия хлорида.
Для постановки пробы одну каплю водного раствора испытуемого вещества вводят глазной
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
пипеткой с вытянутым тонким концом под верхнее веко морским свинкам или кроликам, во второй
глаз (контрольный) вводят 1 каплю воды. Закапывание удобнее производить при положении
животного лежа головой вниз. Используется острое (однократное введение), подострое (ежедневное
введение в течение 3 месяцев) и хроническое введение (ежедневное введение в течение 6 месяцев)
наноматериала.
Для сенсибилизации животных можно использовать дозы
наноматериала,
последовательно на порядок меньше, чем ЛД (при
возможности ее
определения) (1/10, 1/100, 1/1000 от ЛД ).
6.6.2.4. Проведение измерений
Реакции коньюнктивной пробы учитывают через 15 мин. (быстрая реакция) и через 24 - 48 ч
(гиперчувствительность замедленного типа). Степень раздражения и воспаления оценивают через
различные периоды времени после воздействия: при остром введении - в течение 14 дней, при
подостром - в течение 90 дней, при хроническом - в течение 180 дней.
6.6.2.5. Анализ и интерпретация полученных данных
Реакции коньюнктивной пробы оценивают по следующей шкале (в баллах):
1 - легкое покраснение слезного протока;
2 - покраснение слезного протока и склеры в направлении к роговице;
3 - покраснение всей конъюнктивы и склеры.
Наноматериал признается безопасным по результатам тестирования, если реакция отсутствует.